Citrus Research & Technology
https://www.citrusrt.ccsm.br/article/doi/10.4322/crt.ICC034
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Article

Gametic embryogenesis through isolated microspore culture in mandarin (Citrus reticulata Blanco), Mandarino Tardivo Di Ciaculli: effect of meta-Topolin and temperature treatments  

Embriogênese gamética através do cultivo de isolado microspórico em tangerina (Citrus reticulata Blanco), Mandarino Tardivo Di Ciaculli: efeito de meta-Topolins e tratamentos de temperatura 

Giuseppe Cimò, Deborah Casamento, Daniela Torello Marinoni, Roberto Botta & Maria Antonietta Germanà

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Abstract

Haploid technology, allowing the single-step development of complete homozygous genotypes from heterozygous plants through gametic embryogenesis, has already an enormous impact on breeding programs of many important crops. Microspore embryogenesis can be carried out through in vitro culture of anther or isolated microspore. Experiments have been carried out via isolated microspore culture in Citrus reticulata (Blanco), Mandarino Tardivo di Ciaculli, investigating the influence of two culture media, of two plant growth regulator types and of two temperature treatments applied before the culture or just after the culture. After ten months of culture, for all the media tested, different structural features have been observed and registered: uninucleated, binucleated, multinucleated microspores, and, for the first time in mandarin isolated culture, calli and microspore-derived embryos. These results represent advancement in the knowledge of microspore embryogenesis in mandarin. Actually, this is the first time that embryo regeneration from isolated microspore cultures has been reported in mandarin, a genotype very recalcitrant to microspore embryogenesis.
 

Keywords

breeding, haploid, homozygosity, microspore-derived embryos.

Resumo

A tecnologia de haploidia, que permite o desenvolvimento em um único passo de genótipos homozigotos completos de plantas heterozigóticas por meio de embriogênese gamética, já teve um enorme impacto nos programas de melhoramento de muitas culturas importantes. A embriogênese por micrósporo pode ser realizada através da cultura in vitro de uma antera ou micrósporo isolado. Os experimentos foram realizados por meio da cultura de micrósporos isolados em Citrus reticulata (Blanco), Mandarino Tardivo di Ciaculli, investigando a influência de dois meios de cultura, dois tipos de regulador de crescimento e de dois tratamentos de temperatura aplicados antes ou logo após a cultura. Após dez meses, para todos os meios de cultura testados, diferentes características estruturais foram observadas e registradas: micrósporos uninucleados, binucleados e multinucleados e, pela primeira vez em culturas isoladas de tangerina, calos e embriões derivados de micrósporos. Esses resultados representam um avanço no conhecimento da embriogênese de micrósporos em tangerina. Na verdade, esta é a primeira vez que a regeneração embrionária de culturas de micrósporos isolados foi relatada em tangerina, um genótipo muito recalcitrante para embriogênese de micrósporo.

Palavras-chave

melhoramento, haploidia, homozigozidade, embriões derivados de micrósporos
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